
無(wú)機(jī)抗菌劑抗菌性能檢測(cè)方法:如何評(píng)價(jià)抗菌劑抗菌效力


無(wú)機(jī)抗菌劑是一種利用無(wú)機(jī)重金屬離子抗菌作用的新型抗菌材料 ,與有機(jī)抗菌劑相比 ,具有廣譜、耐久、安全的特點(diǎn)。隨著人們對(duì)環(huán)境質(zhì)量要求的提高 ,無(wú)機(jī)抗菌劑具有廣闊的市場(chǎng)前景。無(wú)機(jī)抗菌劑對(duì)細(xì)菌的作用表現(xiàn)在兩個(gè)方面 :抑菌與殺菌。因此,抗菌劑抗菌性能包括抑菌作用(即靜菌力) 與殺菌作用 (即殺菌力) ,對(duì)于抗菌劑本身抗菌性能的檢測(cè) ,包括靜菌力評(píng)價(jià)與殺菌力評(píng)價(jià)兩方面的內(nèi)容。
作為第三方檢測(cè)中心,中科檢測(cè)機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測(cè)資質(zhì),檢測(cè)設(shè)備齊全,數(shù)據(jù)科學(xué)可靠,可出具國(guó)家認(rèn)可的無(wú)機(jī)抗菌劑抗菌性能檢測(cè)報(bào)告。
抑菌性能檢測(cè)方法
靜菌力(即抑菌作用)一般采用電導(dǎo)率法或 MIC 法來(lái)評(píng)價(jià)。
電導(dǎo)率法
微生物在生長(zhǎng)過(guò)程中 ,消耗營(yíng)養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)而放出有機(jī)酸和氨基酸兩種電解質(zhì)。微生物生長(zhǎng)越快 ,電解質(zhì)濃度就越大 ,營(yíng)養(yǎng)液的導(dǎo)電性也越好 ,電導(dǎo)率也就越大。以不含抗菌劑的菌營(yíng)養(yǎng)液作參比 ,以加有抗菌劑的菌營(yíng)養(yǎng)液為處理液 ,比較兩種條件下電導(dǎo)率的變化趨勢(shì) ,就可推斷抗菌劑的靜菌力。
MIC 法
MIC 是指使微生物發(fā)育受阻所需的最小抗菌劑濃度。MIC 值越小 ,抗菌劑的靜菌活性越大。MIC的測(cè)定有兩種方法 ,其一是液體稀釋法。以不含無(wú)機(jī)抗菌劑的菌液作參比 ,以營(yíng)養(yǎng)液作稀釋液 ,把抗菌劑液稀釋不同倍數(shù)后 ,加入一定濃度的菌液 ,混合后作處理液。測(cè)定參比液與處理液各自的濁度 ,若抗菌劑濃度為 Cx 的處理液濁度與參比液濁度相等 ,則此 Cx 即為 MIC 值。其二是固體稀釋法 (即培養(yǎng)基法) 。在培養(yǎng)基中加入不同量的抗菌劑 ,混凝成平板 ,培養(yǎng)菌種 ,1 周后觀(guān)察菌種生長(zhǎng)情況 ,不生長(zhǎng)菌的平板所含抗菌劑濃度即為該抗菌劑的 MIC 值。后法操作較簡(jiǎn)單 ,但影響因素多 ,結(jié)果較粗。
殺菌性能檢測(cè)方法
殺菌力(即殺菌作用)可通過(guò)測(cè)定細(xì)菌數(shù)量、濁度、MBC 等值來(lái)評(píng)價(jià) ,相應(yīng)的方法分別稱(chēng)為細(xì)胞數(shù)量測(cè)定法 ,比濁法和 MBC 法。
細(xì)胞數(shù)量測(cè)定法
通過(guò)測(cè)定比較參比樣與抗菌劑處理樣細(xì)菌數(shù)量的增減來(lái)評(píng)價(jià)抗菌性能。細(xì)胞數(shù)量的測(cè)定 ,多采用菌落計(jì)數(shù)法(colony count) 。
對(duì)于微生物 ,在理論上可認(rèn)為高度稀釋時(shí)每個(gè)活的單細(xì)胞均能繁殖成一個(gè)菌落(colony) ,因而可以用培養(yǎng)的方法使每個(gè)活細(xì)胞生長(zhǎng)成一個(gè)單獨(dú)的菌落 ,并通過(guò)長(zhǎng)出的菌落數(shù)去推算菌懸浮液中的活菌數(shù) ,由此而來(lái)的方法即為菌落計(jì)數(shù)法。以菌液作為參比液 ,在菌液中加入抗菌劑后 ,采用平板涂抹法 ,在 37 ℃培養(yǎng)條件下培養(yǎng) 24h 后測(cè)定參比液與處理液的生存菌數(shù) ,計(jì)算增減值差 :
增減值差 = - 1g(處理液生存菌數(shù)/ 參比液生存菌數(shù))
若該值大于 2 ,則認(rèn)為該抗菌劑具有殺菌作用。
最大或然數(shù)法(MPN)
該法依然根據(jù)菌落計(jì)數(shù)測(cè)定原理 ,但適合于測(cè)定在一個(gè)微生物群中不占優(yōu)勢(shì)卻具有特殊生理功能的類(lèi)群 ,例如污水、牛奶及其它食品 ,或其它場(chǎng)合下的特殊微生物。在測(cè)定之前 ,先采用液體稀釋培養(yǎng)法 ,利用待測(cè)菌特殊生理功能的選擇性來(lái)擺脫其它微生物的干擾 ,逐代優(yōu)化待測(cè)菌 ,并通過(guò)該生理功能的表現(xiàn)來(lái)判斷該群微生物的存在豐度 ,以示殺菌力。
比濁法
在一定濃度范圍內(nèi) ,菌懸浮液中的微生物細(xì)胞濃度與濁度成正比 ,因而通過(guò)測(cè)定濁度 ,間接比較菌液與處理液菌量 ,可檢測(cè)抗菌劑殺菌性能。
MBC(最小殺菌濃度) 法
MBC為抗菌劑殺滅細(xì)菌所需最低濃度。該值越小 ,抗菌劑的殺菌力越大。以無(wú)菌水作稀釋液 ,把細(xì)菌配成個(gè)數(shù)濃度 (以下簡(jiǎn)稱(chēng)為濃度) 10^6 個(gè)/ ml 的懸浮液 ,把抗菌劑懸浮液稀釋到不同倍數(shù)。取菌液1ml ,不同濃度的抗菌劑懸浮液 1ml ,混合后于 30 ℃水浴中振蕩 1h ,然后加入到 2ml 的新鮮培養(yǎng)液中 ,37 ℃恒溫條件下培養(yǎng) 24h ,以不含細(xì)菌的抗菌劑懸浮液作參比 ,測(cè)參比液與處理液各自的濁度。若抗菌劑濃度為 Cx 的處理液濁度與參比液濁度相等 ,則此 Cx 即為 MBC 值。
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