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    藥物敏感試驗(yàn)簡(jiǎn)稱藥敏試驗(yàn)（或耐藥試驗(yàn)）。其目的是了解病原微生物對(duì)各種抗生素的敏感（或耐受）程度，以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素藥物的微生物學(xué)試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)方法包括:稀釋法(包括瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法)、紙片擴(kuò)散法、梯度擴(kuò)散法和自動(dòng)化儀器法。稀釋法是檢測(cè)抗菌藥物敏感性的定量試驗(yàn)方法，為藥敏試驗(yàn)的參考方法。

    作為第三方檢測(cè)中心，中科檢測(cè)機(jī)構(gòu)擁有CMA和CNAS認(rèn)證檢測(cè)資質(zhì)，檢測(cè)設(shè)備齊全，數(shù)據(jù)科學(xué)可靠，可出具國家認(rèn)可的藥敏試驗(yàn)報(bào)告。

    藥敏試驗(yàn)瓊脂稀釋法

    1、制備初始接種菌懸液

    被測(cè)菌株和質(zhì)控菌株配制0.5麥?zhǔn)蠞岫葐挝坏木鷳乙?，作為初始接種物，并按一定順序放入試管架。

    2、稀釋接種菌懸液

    用無菌肉湯或生理鹽水將初始接種物1:10稀釋，混勻后將稀釋后的接種物按排列順序分別吸取0.1mL至96孔微孔板。

    3、 接種菌懸液

    a)標(biāo)記含藥 MHA平皿接種點(diǎn)方向。

    b)采用多點(diǎn)接種儀或標(biāo)準(zhǔn)接種環(huán)等將稀釋后的接種物按順序分別接種1μL~3μL至無抗菌藥物的生長(zhǎng)對(duì)照平皿、含梯度藥MHA平皿表面(從低濃度到高濃度)和第二塊生長(zhǎng)對(duì)照平皿。

    c)平皿室溫放置至菌點(diǎn)干燥，但放置時(shí)間不超過 30min。

    4、 孵育

    置于35 ℃±2 ℃空氣環(huán)境中孵育16 h~20h。苛養(yǎng)菌的藥敏試驗(yàn)平皿孵育條件和時(shí)間按規(guī)定。

    5、結(jié)果判讀

    將平皿置于黑色、無反光背景上讀取結(jié)果。以抑制細(xì)菌肉眼可見生長(zhǎng)的最低濃度為MIC。

    藥敏試驗(yàn)肉湯稀釋法

    1、制備初始接種菌懸液

    被測(cè)菌株和相應(yīng)質(zhì)控菌株如大腸埃希菌ATCC25922配制0.5麥?zhǔn)蠞岫葐挝坏木鷳乙海鳛槌跏冀臃N物菌懸液。

    2、稀釋接種菌懸液

    用制備的CAMHB肉湯將初始接種物1:100倍稀釋(微量肉湯稀釋法)或1:150倍(宏量肉湯稀釋法)稀釋，混勻。

    3、接種菌懸液

    a)將稀釋后的接種物按順序依次吸取 0.05m,至1步驟制備的含等量藥 96孔微孔板或吸取1mL,至2步驟制備的含等量藥試管中。

    b)稀釋菌液在15min內(nèi)接種完畢。

    c)同時(shí)將稀釋后的接種物接種至不含抗菌藥物的非選擇性瓊脂平皿，以檢測(cè)接種菌懸液的純度。

    d)微量肉湯稀釋法:將稀釋后的菌懸液接種至不含抗菌藥物微孔作為生長(zhǎng)對(duì)照，同時(shí)設(shè)置不加接種菌懸液的含藥孔。

    e)宏量肉湯稀釋法:設(shè)置每一株菌的初始接種物的不含藥的生長(zhǎng)對(duì)照管。

    4、 孵育

    接種好的菌液和抗菌藥物混合液置于35℃±2℃孵箱中孵育16h~20 h。苛養(yǎng)菌的藥敏試驗(yàn)平皿孵育條件和時(shí)間按規(guī)定。

    5、接種菌懸液的菌落計(jì)數(shù)

    每一批試驗(yàn)應(yīng)同時(shí)進(jìn)行接種菌懸液的菌落計(jì)數(shù),以保證微量肉湯稀釋法和宏量肉湯稀釋法的最終接種菌懸液濃度。

    6、結(jié)果判讀

    a)以抑制細(xì)菌肉眼可見生長(zhǎng)的最低濃度為 MIC。

    b)根據(jù)生長(zhǎng)對(duì)照孔/管菌液生長(zhǎng)量判定生長(zhǎng)終點(diǎn)。革蘭陽性球菌檢測(cè)氣霉素、克林霉素、紅霉素、利奈唑胺和四環(huán)素時(shí)，易出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，讀取拖尾現(xiàn)象開始的第一個(gè)孔的 MIC值，忽略微小菌膜。若存在多孔跳孔現(xiàn)象，需重新檢測(cè)。